《刺客教条：兄弟会》中文版藉由30 万字完整中文化，让玩家能清楚了解兄弟会的曲折发展。刺客教条系列从一代开头就带给玩家冲击性的剧情，当时媒体还笑称有部分消费者执行游戏时，误以为自己买错产品，明明宣传上的介绍都说这是一款中世纪背景动作游戏，为何一开启画面却是现代科幻场景呢？

　　原来刺客教条系列采双轨剧情，玩家所扮演的戴斯蒙，为了在现代找出刺客家族守护长达千年的秘密，将藉由虚拟实境科技回溯基因记忆，回到中世纪扮演自己的祖先，包括阿泰尔、伊吉欧等人，以他们的视角亲身体验历史。让人不禁联想到《骇客任务》这段经典对白：「何谓真实？你如何定义真实？如果你的真实来自所闻、所尝、所见……等一切感觉，那么真实不过是被脑部编译过的电子信号。」

　　因此玩家透过戴斯蒙之眼，得以重回中世纪与文艺复兴时代，代表「潜行黑暗却为光明服务」的刺客家族，和妄图操控人类思想的圣殿骑士团展开争夺伊甸园「禁果」的战争，并参与中世纪众多真实历史事件和政争阴谋，在历史的暗影中默默守护人类的自由意志。

　　《刺客教条：兄弟会》的剧情承接《刺客教条2》，是伊吉欧三部曲的中章。虽然2 代时伊吉欧一度以个人之力压制波吉亚家族及其以教宗之名统领的圣殿骑士团，但本作中教宗之子则是凭强大军力率骑士团卷土重来，不但打败伊吉欧也夺走禁果。

　　于是罗马城落入波吉亚家族的掌控，在独裁者的高压统治下百业萧条、民不聊生，但波吉亚家族却进一步筹画战争，准备将义大利全土纳入麾下。为了夺回禁果与阻止战争，伊吉欧成立地下组织刺客兄弟会，除了号召马基维利、达文西、伯爵夫人卡特琳娜等人加入，也串连工商业界并积极招募平民，在累积反抗实力的同时也复兴罗马，因此延伸出众多崭新游戏要素：

◆ 招募参与战斗的刺客新血

　　在高压统治下虽然大部分人民迫于威胁保持沉默，但仍有不少人愿意加入兄弟会投身反抗运动前线。前提是玩家要找到这些人，并协助他们脱离困境。和前作佣兵、盗贼等雇佣关系不同，兄弟会成员能够始终伴随玩家，只要玩家一个手势，他们就能群起攻之协助刺杀，甚至也能在玩家指派下独立进行任务，在过程中获取经验值而成长。

◆ 投资工商复兴罗马

　　面对波吉亚家族的暴虐，罗马城不仅百业萧条甚至连百年古迹也崩毁。因此玩家可以投资商店开业寻回城市人气，这些资产也能为伊吉欧的银行帐户带来获利，店面增加也会让玩家的药品、武器、装备……补给更为便利，另外也能重建花费较高却能大幅改变市容的古迹与文化建筑。

◆ 全新动作招式

　　右手寒刃割喉，左手袖炮爆头。在兄弟会中Ezio拥有许多过去未见的战斗技巧，能左手枪、右手剑，同时搭配不同武器施展连击，比以往更有杀伤力；同时新增投技，把敌人一把摔飞的身手让人联想到合气道或柔术；反击招式、武器型态也大量更新，像是掷斧杀人等。

◆ 杀戮兵器登场

　　出于某种原因，除了降落伞、武装滑翔翼等，达文西又制作了许多原本不该出现在世上的杀戮兵器原型，包括机枪、坦克、舰炮等。玩家将有机会操纵这些兵器和圣殿大军正面冲突，体验与游戏主线大异其趣的玩法。另外马匹的功能也获得扩增，Ezio 将会拥有马上的攻防与暗杀技巧，而敌人也出现强力的骑兵单位，与马儿打交道的时间大幅增加。

◆ E3 展最佳多人游戏

　　在多人模式中共有医生、理发师、交际花、牧师……近20 种大量职业能够选择，不同职业能使用不同武器和招式。不管何种职业，都能在对战过程获得经验值，升级后可解开新技能与装备，像是烟雾弹之类的实用道具。而当玩家选定职业后，会发现对战地图里有许多和自己或其他玩家造型一样的NPC，因此如何利用人群隐藏自己，找出动作与周遭格格不入的角色，是对战里生存和获取高分的关键。